Une autre source de différence peut venir du protocole: l'absence de béta-mercapto-éthanol (ou de DTT) dans le bleu de migration permettant de préserver les ponts disulfures, font que les 2 sous-unités d'une protéine restent attachées et migrent sous la forme d'une seule entité de grande taille. Cette différence peut tout simplement être due à une estimation imprécise due au marqueur de poids. En effet il faut avoir à l'esprit, qu'un marqueur pré-coloré est pratique mais reste imprécis. Échelle de protéines précolorée BlueStar PLUS - NIPPON Genetics EUROPE. Il permet d'évaluer la taille de sa protéine d'un coup d'œil, mais ne permettra jamais d'évaluer précisément sa taille réelle. Une mesure précise doit être effectuée avec un marqueur non coloré. En effet les colorants qui sont greffés sur les protéines qui constituent le marqueur modifient leur taille et donc leur migration.
Haute performance: 12 bandes avec 3 couleurs (bleue, rouge et verte) Bandes de référence: 25 kDa (vert), et 75 kDa (rouge) Bandes nettes Composition Environ 0, 1 à 0, 4 mg / ml de chaque protéine dans le tampon (Tris-phosphate 20 mM, 2% de SDS, dithiothréitol 0, 2 mM, urée 3, 6 M et glycérol à 15% (v / v)). Stockage Stocker à -20 °C pendant 12 mois. Stable à +4 °C pendant 3 mois. Recommendations 1. Décongeler l'échelle à température ambiante ou à 37-40 °C pendant quelques minutes pour dissoudre les précipités. Ne pas faire bouillir. 2. Marqueur de taille proteine nelle urine. Bien mélanger pour que la solution soit homogène. 3. Ajouter les volumes suivants de l'échelle sur le gel SDS-PAGE: 5 µl par puit pour les mini-gels, 3 µl par puit pour les blots 10 μl par puit pour les gros gels, 6 μl par puit pour les blots Surveiller la migration des protéines pendant l'électrophorèse sur SDS-PAGE Surveiller le transfert des protéines sur membranes pendant le Western Blot Estimer la taille des protéines sur SDS-PAGE ou Western blot Manuel MWP04_Manuel Fiches de données de sécurité (MSDS) FAQ Quels acides aminés sont liés au marqueur MWS04 BlueStar PLUS?
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